Análise macro e micromorfológica de Fungos Assexuais- EXPERIMENTAÇÃO

Análise macro e micromorfológica de Fungos Assexuais

Editora Unesp- O incrível mundo dos fungos autores Gisela Ramos Terçarioli, Lucia Maria Paleari e Eduardo Bagagli /2010

Análise macroscópica I (a olho desarmado):

1. Observar as UFCs (unidades formadoras de colônias de fungos) com a placa de petri ainda fechada (parte superior – com a tampa para baixo)

2. Quantificar (por contagem) as UFCs, caso seja possível (quando não existe sobrecrescimento de UFCs)

3. Observar cada UFC quanto a: (i) aspecto (filamentoso, não-filamentoso), (ii) coloração (branca, verde, negra, castanha, etc.)

4. Com a placa de petri ainda fechada, inverter a placa e observar fundo da mesma, tentando correlacionar as UFCs que foram vistas por cima com as observadas por baixo

Análise macroscópica II (com o auxílio de estereomicroscópio):

1. Levar a placa de petri ao microscópio estereoscópico

2. Ligar a lâmpada (luz refletida)

3. Abrir a placa de petri

4. Selecionar uma colônia para ser visualizada por vez

5. Observar a UFC selecionada, inicialmente com a lente de menor aumento

6. Tentar identificar as estruturas somáticas (micélio) e estruturas reprodutivas (esporangióforos, esporângios, conidióforos), se houver

7. Visualizar as estruturas somáticas e/ou reprodutivas em lentes de maior aumento

Preparo da lâmina para observação ao microscópio

1. Retirar, com auxílio de uma pinça e um estilete, pequena quantidade do micélio e/ou estruturas reprodutivas de uma UFC

2. Colocar o material retirado sobre uma lâmina previamente limpa e seca

3. Colocar, com o auxílio de um conta-gotas, 1 gota de água destilada

4. Desfiar suavemente o material sobre a lamínula, utilizando duas pinças (uma delas para manter parte do material firme e a outra para puxar outra parte do material).

5. Cobrir com uma lamínula (a descida da lamínula deve ser feita delicadamente para que não haja formação de bolhas)

Análise microscópica (com o auxílio de microscópio):

1. Levar o material ao microscópio

2. Ligar a lâmpada (luz transmitida)

3. Focalizar a montagem com a objetiva de menor aumento (4x)

4. Tentar identificar as estruturas somáticas (micélio com hifas septadas) e estruturas reprodutivas (conidióforos) já visualizadas na análise macroscópica

4. Observar o material com as outras objetivas secas de maior aumento (10x e 40x), visualizando os detalhes das estruturas, bem como os esporos