domingo, 6 de maio de 2018

COLORAÇÃO DAS RAÍZES DE FMA



COLORAÇÃO DE RAÍZES ( Phillips e Hayman,1970)




Materiais utilizados:


KOH (10%);

HCl (1%);

H²O (10%)

Azul de trypan( 0,05%);

Lactoglicerol;

Pinça;

Vasilha de plástico

*azul de tripan

500 ml de glicerol

450 ml de água destilada

50 ml de HCl

O,o5g de azul de trypan

PROCEDIMENTO:


Segundo Phillips e Hayman:

*para raízes menos pigmentadas:

Coloca-se as raízes no KOH (10%) a uma temperatura de 90 ºC por 2 horas. Depois coloca no peróxido de hidrogênio 1-10 minutos ( observando a cor das raízes). Lava-se as raízes em água corrente e coloca-se em HCl (1%) por 5 minutos. Posteriormente deixa-se as raízes em overnight (22h) no azul de trypan.

No Laboratório:

Coloca-se as raízes no KOH (10%) em overnight (pode-se deixar por 24h), depois tira-se o KOH utilizando uma peneira para as raízes não caírem na pia. Lava-se as raízes em água corrente até sair todo o KOH, após isso as raízes são colocadas em HCl(1%) por 5 minutos para serem acidificadas. Posteriormente retira o HCl e coloca o azul de trypan, uma quantidade suficiente para cobrir as raízes, e deixa em overnight ( pode deixar por 24h). Após esse tempo retira o azul de trypan e coloca-se o Lactoglicerol para conservar as raízes. Após isso elas estarão prontas para serem avaliadas.

OBS: Para as raízes mais pigmentadas